Mikroskopi spora, hifa, cystidia, trama, untuk mengidentifikasi jamur

Mikroskop majemuk cocok untuk mempelajari jamur

Informasi di bawah ini adalah ringkasan ringkasan dari buku terbaru Pat O'Reilly, 'Fascinated by Fungi' . Untuk detail lengkap dan halaman sampel lihat Toko Buku kami, di mana Anda dapat memesan salinan yang ditandatangani penulis secara online ... (Buku ini juga berisi glosarium istilah mikologi, dan kami memiliki versi ringkasan di sini untuk membantu para pemula ...)

Mikroskopi dan Fotomikografi

Jika Anda tidak dapat mengidentifikasi jamur di lapangan, Anda mungkin perlu membawa pulang sampel untuk dipelajari lebih lanjut. Tidak ada gunanya melakukannya kecuali ada sesuatu yang dapat Anda lakukan di rumah yang tidak dapat Anda lakukan di lapangan. Penyelidikan mikroskopis adalah sesuatu yang paling baik dilakukan di dalam ruangan ketika Anda memiliki cukup waktu untuk melakukan sesuatu dengan benar. Berikut beberapa tip dalam memilih dan menggunakan mikroskop untuk tujuan ini.

Mikroskop mainan dapat digunakan untuk melihat struktur hewan dan tumbuhan, tetapi untuk mikologi Anda benar-benar membutuhkan mikroskop yang baik. Itu karena struktur halus jamur sangat kecil - beberapa di antaranya mendekati batas dari apa yang dapat diselesaikan dengan menggunakan cahaya. Panjang gelombang sinar-X jauh lebih pendek daripada gelombang cahaya, dan begitu banyak detail yang dapat dipelajari dengan menggunakan mikroskop sinar-X. Tetapi jika Anda berpikir mikroskop optik adalah alat yang mahal untuk sesuatu yang bagi sebagian besar dari kita hanyalah hobi, jangan pernah berpikir untuk mendekorasi ulang rumah Anda untuk mikroskop sinar-X paling bawah.

Spora Lactarius azonites
Spora Lactarius azonites , dilihat melalui lensa mikroskop oil immersion

Untuk mempelajari spora jamur, basidia, cystidia, sphaerocysts, dan ciri-ciri kecil jamur lainnya, Anda memerlukan mikroskop yang mampu melakukan pembesaran minimal x 400. Idealnya, gunakan mikroskop dengan perbesaran maksimum x 1000, tetapi untuk mendapatkan gambar yang cukup jelas pada perbesaran tinggi seperti itu, mikroskop harus memiliki lensa minyak imersi.

Dimensi dan ornamen (kutil berduri, misalnya - lihat gambar, kiri) spora adalah fitur pengenal utama, dan agar Anda dapat mengukur dimensi benda yang Anda lihat, Anda memerlukan lensa mata yang memiliki mikrometer okuler atau yang lainnya. cara kalibrasi. Jika Anda menemukan instruksi yang diberikan dengan mikroskop membingungkan (atau jika Anda cukup beruntung untuk mengambil barang bekas tanpa buku pegangan), seseorang dalam kelompok jamur lokal Anda hampir pasti akan bersedia membantu Anda mengatur dan mengkalibrasi Anda. sistem.

Mikroskop saya sendiri adalah trinokuler sehingga adaptor kamera dapat digunakan bahkan saat saya melihat melalui eyepieces. (Sebagian besar waktu saya hanya mengamati gambar yang ditransfer ke layar komputer saya.)

Fitur mikroskop 'yang harus dimiliki' lainnya meliputi:

  1. Iluminasi yang dapat disesuaikan, paling sering dari langsung di bawah slide, dan disebut iluminasi bidang terang. (Untuk instrumen biologis, iluminasi medan gelap juga dari bawah tetapi pada sudut yang memastikan cahaya langsung tidak masuk ke tujuan; ini memerlukan kondensor medan gelap khusus atau, untuk pembesaran rendah, tanda titik hitam dimasukkan ke jalur cahaya.)
  2. Kenop kontrol untuk menggerakkan bidang mekanis yang menahan perosotan
  3. Kontrol fokus yang kasar dan halus

Pewarnaan bahan kimia

Sphaerocysts dalam struktur batang Russula cyanoxantha, Pembakar Arang
Sphaerocysts dalam struktur batang Russula cyanoxantha , jamur hutan yang umumnya dikenal sebagai Pembakar Arang, bertanggung jawab atas kerapuhannya. Gambar ini diambil melalui mikroskop dengan perbesaran x600. Bahan batang pada slide diwarnai dengan Congo Red.

Struktur halus spora dan banyak bagian kecil jamur lainnya yang ingin Anda lihat di bawah mikroskop hampir seluruhnya tembus cahaya. Mereka dapat terlihat dengan jelas hanya jika telah ternoda. Sebagai bantuan lebih lanjut untuk identifikasi banyak jamur menghasilkan spora yang berubah warna saat bersentuhan dengan bahan kimia tertentu, yang disebut sebagai reagen (karena reaksi ketika spora bersentuhan dengan mereka). Berikut adalah beberapa bahan kimia, noda dan reagen yang paling umum digunakan dalam mikroskop mikologi:

Air sulingan

(Ya, H2O lama yang bagus!) Jika Anda ingin melihat subjek kecil dan melihat warna aslinya, air adalah bahan pembasah yang ideal. Air ledeng mengandung bahan kimia tambahan yang dapat membatasi masa pakai slide, dan air hujan bersifat asam dan sama bermasalahnya, tetapi air suling tidak mahal dan mudah didapat. Anda mungkin perlu menambahkan setetes bahan pembasahan fotografi untuk menghindari distorsi gambar karena gelembung udara kecil yang menempel pada spora atau bahan subjek lainnya. (Cairan pembersih bekerja!) Menambahkan sekitar 10% gliserin akan memastikan bahwa slide bertahan lebih lama sebelum mengering.

Amonia (NH3)

Bahan kimia yang berguna namun berpotensi berbahaya ini mengeluarkan uap yang sangat menyengat, sehingga botol harus ditutup rapat setiap saat kecuali selama penggunaan. (Amonia rumah tangga dari toko perangkat keras mana pun tidak masalah.) Selain pereaksi, yang menyebabkan perubahan warna pada beberapa jenis jamur, amonia adalah komponen pereaksi tertentu lainnya. Amonia murni adalah gas pada suhu kamar normal, dan untuk penggunaan mikologi larutan 10% dalam air suling adalah konsentrasi normal. Itu kuat, dan jika mengenai mata itu akan menyebabkan kerusakan serius.

Besi sulfat (FeSO4)

Banyak peternak jamur dan ahli mikologi membawa dalam kit lapangan mereka kristal besi sulfat, yang dikenal dengan bahasa sehari-hari sebagai Garam Besi, untuk digosokkan pada jamur (khususnya getas) untuk memeriksa reaksi warna. Jangan menghabiskan biaya untuk membeli kristal kelas farmasi; barang-barang yang dijual di pusat-pusat taman sebagai pembunuh lumut dan untuk menurunkan alkalinitas tanah adalah murah (oops!) dan bekerja dengan baik.

Kalium hidroksida (KOH)

Ini digunakan baik sebagai media pemasangan (biasanya bersama dengan bahan kimia pewarnaan) dan sebagai reagen, baik di lapangan atau di belakang alas. Permukaan tutup atau insang beberapa jamur berubah warna secara dramatis saat disentuh oleh KOH; mereka bisa berubah menjadi kuning, merah, magenta, zaitun atau hitam, misalnya, tergantung pada spesiesnya. Jadi, ketika Anda membuat slide mikroskop menggunakan KOH tidak hanya itu diawetkan dari pembusukan tetapi Anda juga dapat memperoleh reaksi warna diagnostik yang kadang-kadang dapat berkontribusi sebanyak mungkin untuk proses identifikasi seperti halnya data ukuran dan bentuk yang diperoleh melalui mikroskop.

Reagen Melzer

Campuran bahan kimia ini sulit didapat karena salah satu komponen krusialnya adalah zat kloral hidrat yang berpotensi berbahaya (obat pemerkosaan kurma). Komponen lain mudah diperoleh - kristal yodium, kalium iodida, dan air suling. Yodium bereaksi dengan zat bertepung menghasilkan warna biru kehitaman yang intens, dan spora jamur yang mengandung pati disebut 'amiloid'. Jika Anda bergabung dengan grup jamur di Inggris, Anda mungkin bisa mendapatkan Reagen Melzer melalui Association of British Fungus Groups (ABFG). Spora dari spesies jamur dapat mengalami perubahan warna diagnostik saat diwarnai dengan Reagen Melzer. Spora disebut:

  1. Amiloid jika berubah menjadi biru kehitaman.
  2. Dextrinoid jika berubah warna menjadi coklat kemerahan.
  3. Inamyloid (atau negatif) jika berubah menjadi kekuningan atau tidak berubah sama sekali.

Istilah ini digunakan dalam panduan lapangan yang mencantumkan karakter uji kimia untuk setiap spesies.

Noda

Asci dari Poronia punctata
Asci dari Poronia punctata , Jamur Kuku

Alasan utama penggunaan noda saat membuat slide mikroskop adalah untuk:

  1. meningkatkan kontras dalam gambar mikroskopis
  2. sorot struktur jaringan tertentu

Seringkali noda digunakan bersama dengan bahan kimia lain yang membantu mencegah pembusukan atau pengeringan bahan subjek.

Contoh zat pewarna meliputi:

Kongo Merah

Pewarnaan serba guna yang sangat baik untuk melihat detail halus dari struktur hifa (misalnya, lihat gambar trama insang Amanita rubescens , kanan, di mana dimensi yang ditandai dalam mikron.) Disuplai sebagai bubuk dan paling baik dilarutkan dalam 10% larutan amonia.

Safranin

Pewarnaan lain yang menghasilkan inti sel darah merah.

Lactophenol Cotton Blue

Ini noda kitin, membuat struktur seperti ornamen spora muncul jauh lebih jelas daripada yang mereka lakukan dengan kebanyakan noda lainnya (termasuk Kongo Merah).

Bidikan perpisahan - nah, yang ini lebih berkaitan dengan menghindari kepergian. Bahan kimia yang disebutkan di atas mencakup beberapa zat yang sangat berbahaya, bersifat asam, dan beracun, sehingga harus disimpan di tempat yang tidak dapat dijangkau oleh anak-anak. Asap dari amonia, misalnya, dapat membakar mata - pada kenyataannya beberapa tes hanya memerlukan uap amonia untuk melewati jaringan jamur untuk menimbulkan perubahan warna.

Mikroskop trinokuler

Brankas yang aman bisa menyelamatkan nyawa. Saya memiliki satu yang dibaut ke dinding di sebelah bangku tempat saya menyimpan mikroskop saya (lihat gambar di atas), dan sangat ideal untuk menyimpan bahan kimia, silet, slide kaca, dll.

Spora

Atas: spora Jamur kulit jeruk Aleuria aurantia

Membuat Slide

Slide yang paling mudah dibuat adalah spora. (Ditunjukkan di sini adalah spora Agaricus bisporus , jamur kancing komersial yang selalu tersedia di toko bahan makanan dan supermarket.) Yang harus Anda lakukan adalah meletakkan jamur, sisi subur ke bawah, ke kaca objek mikroskop dan tunggu satu atau dua jam.

Tidak seperti ketika mencoba membuat cetakan spora yang bagus Anda bahkan tidak perlu menutupi semuanya, meskipun saya biasanya melakukannya hanya sebagai pengingat bahwa ada sepotong kaca tajam di bawahnya. Karena Anda ingin dapat melihat spora yang terpisah daripada menentukan warna spora saat menumpuk lapisan demi lapisan, Anda tidak memerlukan cetakan yang padat sehingga Anda tidak boleh membiarkannya terlalu lama.

Setelah Anda memiliki beberapa debu spora pada slide, tambahkan setetes bahan pembasah (air sabun cukup!) Atau noda yang sesuai jika spora bening dan bukan berwarna, dan letakkan penutup kaca di atasnya. Reagen Melzer adalah pilihan yang baik karena pada saat yang sama meningkatkan kontras, jika Anda menahan kaca objek ke arah cahaya, Anda akan dapat melihat apakah spora tersebut adalah amiloid, dekstrinoid atau inamiloid - yang mana nanti ....

Geser - 1

Membuat slide dari irisan jaringan jamur yang sangat tipis lebih sulit, dan Anda harus mengharapkan lebih banyak kegagalan daripada kesuksesan. Kesulitannya adalah membuat potongan yang sangat tipis dan rata yang berisi fitur yang ingin Anda pelajari. Pada insang spesies agaricoid, Anda mungkin ingin mempelajari basidia - ekstensi hifa (biasanya) berbentuk klub tempat sterigmata dan spora berasal.

Setelah Anda memotong sliver tipis menggunakan silet tajam, atau mencabut setrip menggunakan pinset berhidung jarum, prosesnya sama seperti pada slide spora. Letakkan spesimen Anda di atas kaca objek, tambahkan beberapa tetes noda dan kemudian kaca penutup, berikan sedikit tekanan untuk meratakan bagian tersebut. Bersikaplah lembut: kebanyakan slip penutup memiliki ketebalan lebih dari sepersepuluh milimeter, dan sangat mudah pecah. Hilangkan noda berlebih menggunakan tisu penyerap dan tunggu beberapa menit sampai noda meresap ke dalam spesimen.

Geser - 2

Variasi dari pendekatan ini - agak lebih mudah tetapi lebih merupakan teknik hit and miss - adalah dengan menekan spesimen yang cukup tipis di antara dua slide - dengan keberuntungan, bit yang Anda minati akan dimuntahkan di salah satu tepinya. Gunakan noda seperti sebelumnya untuk menonjolkan fitur tepi ini.

Saat mempelajari basidiomycetes di bawah mikroskop, Anda tidak terbatas pada ukuran dan bentuk spora. Anda juga bisa menyelidiki berbagai jenis sistidia. Ini adalah struktur hifa yang menonjol dari berbagai permukaan. Bergantung di mana mereka muncul mereka diberi nama yang berbeda: pleurocystidia terjadi pada wajah insang, cheilocystidia adalah yang di tepi insang, pileocystidia terjadi pada permukaan tutup, dan caulocystidia adalah yang ditemukan di batang jamur. Bentuk cystidia di masing-masing lokasi ini mungkin berbeda, dan perbedaan ini dapat membantu Anda, eh… membedakan antar spesies.

Gill trama dari Hygrocybe chlorophana

Fotomikrograf yang ditunjukkan di atas adalah batang insang dari Hygrocybe chlorophana , Golden Waxcap. Tidak semua waxcaps dapat diidentifikasi hingga tingkat spesies dengan memeriksa karakter makroskopis. Beberapa paling baik ditentukan dengan memeriksanya di bawah mikroskop, sementara beberapa membutuhkan pemeriksaan makroskopik dan mikroskopis. Menekan sepotong kecil bahan insang (trama insang) di antara slide dan kaca penutup memungkinkan Anda mempelajari struktur jaringan. Beberapa memiliki hifa yang terjalin; beberapa teratur (hifa terletak sejajar satu sama lain) dan yang lainnya tidak teratur (di suatu tempat di antara keduanya). Sel-sel panjang Hygrocybe chlorophana terlihat jelas di sini, sedangkan sel-sel hifa misalnya Hygrocybe miniata , Vermillion Waxcap) jauh lebih pendek.

Perangkat lunak untuk membuat fotografi mikroskop tidak terlalu menyusahkan

Jika Anda pernah mencoba memotret spora atau potongan jaringan jamur lainnya di bawah mikroskop, Anda akan tahu betapa sulitnya memfokuskan semuanya. Anda mendapatkan satu bagian tajam dan sisanya buram. Masalah ini disebabkan oleh kedalaman bidang yang sangat terbatas yang tersedia pada perbesaran tinggi. Perangkat lunak spesialis tetapi tidak mahal dapat membantu Anda. Anda mengambil beberapa gambar dengan fokus pada kedalaman yang berbeda ke dalam sampel jaringan, dan perangkat lunak membuat gambar menggunakan bagian fokus dari berbagai gambar Anda. Mengukur spora jamur menjadi jauh lebih mudah dengan program yang disebut Mycocam4. Diproduksi oleh ahli mikologi Richard Shotbolt, ini tersedia sebagai unduhan gratis dari www.shotbolt.com - dan sangat mudah digunakan.

Mikroskopi adalah subjek spesialis dan bukan sesuatu yang semua orang tertarik pada jamur ingin terlibat di dalamnya. Untuk informasi lebih lanjut tentang subjek ini terdapat teks spesialis, dan untuk bantuan dalam memilih dan menyiapkan mikroskop, situs web pemasok independen yang andal seperti Brunel Mikroskop adalah titik awal yang baik. Biasanya mungkin untuk mengatur kunjungan untuk membahas kebutuhan spesifik Anda dan mencoba beberapa alternatif.

Contoh

Pada banyak halaman spesies jamur kami, Anda akan melihat contoh foto spora yang diambil menggunakan mikroskop dengan lampiran kamera digital. Misalnya, lihat Laccaria bicolor , yang memiliki ornamen spora yang menarik; dan Cuphophyllus pratensis , yang memiliki spora ellipsoid atau berbentuk air mata hingga subglobose.


Jika Anda merasa informasi ini berguna, kami yakin Anda juga akan menemukan buku kami Fascinated by Fungi oleh Pat O'Reilly sangat berguna. Salinan bersampul tebal yang ditandatangani penulis dengan harga diskon khusus tersedia di sini ...

Buku alam lainnya dari First Nature ...